及時解決大小鼠脊髓模具故障是保障其正常使用的核心
大小鼠脊髓模具是神經科學研究中用于脊髓組織標準化取材、固定與切片的關鍵輔助工具。其精密槽道設計可有效保持脊髓解剖完整性,提升實驗重復性。在實際操作中,可能會因組織處理不當、模具匹配錯誤或操作粗放導致組織變形、斷裂、脫模困難等問題,嚴重影響后續染色、成像及數據分析。科學識別大小鼠脊髓模具出現故障的根源并采取針對性措施,是保障其正常使用的核心。

一、脊髓在模具中移位或漂浮
原因:包埋劑注入過快產生氣泡,或OCT未充分浸潤組織。
解決方法:
緩慢傾斜注入OCT,讓液體自然填充槽道,避免沖擊脊髓;
用細針輕壓脊髓使其貼底,再補加包埋劑;
對固定后較硬的脊髓,可先在模具中滴少量OCT預粘附,再整體包埋。
二、脫模時組織斷裂或粘連模具
多因冷凍不充分或模具未預冷:
確保模具與OCT塊在–80℃冷凍≥30分鐘,形成均勻冰晶結構;
脫模前將模具短暫置于室溫(1–2秒)或用手心微熱外壁,使OCT輕微融化即可輕松脫出;
若反復粘連,可在模具內壁薄涂一層防粘劑(如稀釋的甘油),但需避免污染組織。
三、切片時脊髓橫斷面不完整或碎裂
典型為組織未固定或冷凍速率不當:
灌注后脊髓需在4%多聚甲醛中后固定12–24小時(4℃),增強韌性;
冰凍切片前避免反復凍融,防止冰晶破壞細胞結構;
切片刀保持鋒利,切片速度調慢,溫度控制在–18℃至–22℃。
四、模具槽道殘留OCT或石蠟難以清除
OCT殘留:用溫水(≤40℃)浸泡10分鐘軟化后沖洗,勿用熱水以防模具變形;
石蠟殘留:浸泡于二甲苯或專用脫蠟液中溶解,再用乙醇梯度清洗;
清潔后晾干,避免水漬腐蝕金屬模具。
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