大小鼠脊髓模具的規范操作方法分享
大小鼠脊髓模具是一種專用于神經科學研究中脊髓組織精準定位、固定與切片制備的實驗輔助工具,廣泛應用于脊髓損傷、神經退行性疾病及藥物干預等動物模型研究。其通過標準化槽道設計,確保脊髓在灌注、取材、冰凍或石蠟包埋過程中保持解剖完整性與空間一致性,從而提升組織切片質量與實驗可重復性。掌握大小鼠脊髓模具科學、規范的操作方法,是實現準確的關鍵。

一、使用前準備
清潔模具:使用前以75%乙醇擦拭或超聲清洗,去除殘留組織或固定液,避免交叉污染;
預冷處理:冰凍切片用模具需提前置于–20℃冰箱或干冰上預冷,防止組織融化;
匹配規格:根據實驗動物種類選擇對應模具——小鼠模具槽道長約3–4cm,大鼠約4–5cm,直徑適配胸腰段脊髓(小鼠Φ1.5–2mm,大鼠Φ2.5–3mm)。
二、脊髓取材與置入規范
動物經心臟灌注生理鹽水及4%多聚甲醛后,迅速取出整段脊柱,置于冰冷PBS中;
在解剖顯微鏡下小心剝離椎骨,完整取出脊髓,避免牽拉或擠壓;
將新鮮或固定后的脊髓輕柔置入模具中央槽道,確保頭尾方向一致,無扭曲或折疊。
三、包埋與固定操作
冰凍切片:注入OCT包埋劑至沒過脊髓,傾斜緩慢排除氣泡,–80℃速凍;
石蠟切片:將模具連同脊髓轉入脫水梯度,再浸蠟包埋,確保組織與蠟充分融合;
包埋過程中可用細針輕壓脊髓,使其貼合槽底,防止漂浮偏移。
四、脫模與切片要點
冰凍塊從模具中輕敲脫出,若粘連可短暫回溫1–2秒;
切片時使脊髓橫斷面垂直于刀片,確保獲得標準橫切面;
對縱切實驗,可選用帶縱向槽道的專用模具,或旋轉90°放置脊髓。
五、使用后維護
切勿用金屬器械刮擦模具內壁,以免劃傷影響后續組織貼合;
OCT殘留可用溫水浸泡軟化后沖洗,石蠟殘留用二甲苯溶解;
干燥后存放于潔凈盒中,避免灰塵沉積。
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